مطالعه تاثیر فاکتورهای رشد tgf-β۲ وbmp-۲ بر تمایز سلول های بنیادی جنینی به کاردیومیوسیت
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: تحقیقات در زمینه سلول های بنیادی و کاربردهای بالقوه آنها نویدی برای درمان بسیاری از بیماری های صعب العلاج از جمله آسیب های قلب فراهم نموده است. در این رابطه تمایز هدایت شده و تحت کنترل سلول های بنیادی به سلول های میوکاردی در خارج از بدن و حتی در موضع بافت آسیب دیده حائر اهمیت است. با توجه به نقش دو فاکتور tgf-β2 وbmp-2 از خانواده بزرگ فاکتورهای رشد tgf-β در رشد، تمایز، مهاجرت و سایر اعمال سلولی طی تکامل جنینی، در مطالعه حاضر اثرات این دو فاکتور بر تمایز سلول های بنیادی جنینی به کاردیومیوسیت مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: سلول های بنیادی جنینی موش نژاد 129 از رده ccb برای تولید کاردیومیوسیتها مورد مطالعه قرار گرفتند. در این روش به منظور تأثیر هرچه بیشتر فاکتورهای فوق، کلونی سلول های بنیادی در گروه های تجربی بر روی فیبروبلاست غیرفعال کشت داده شد و به مدت 24 ساعت با محیط کشت تمایزی حاوی ng/ml8 فاکتور tgf-β2 و ng/ml5 فاکتور bmp-2 همراه با کاهش سرم از 20% به 5/7% تغذیه شدند. سپس از این سلولها اجسام جنینی 800 سلولی در قطرات معلق و سوسپانسیون تهیه گردید و سپس اجسام جنینی در پلیت های ژلاتینه کشت داده شدند. با تداوم کشت سلول های بنیادی به سلول های ضربان دار تمایز یافتند. به منظور تائید تأثیر فاکتورها بر تمایز سلول های بنیادی جنینی به کاردیومیوسیت، بیان فاکتورهای رونویسی اولیه mef-2 وnkx2.5 و ژن های تخصصی سلول های قلبی mhc،anf و mlc-2vبا روش rt-pcr نیمه کمی و بیان پروتئین دسمین و آلفا اکتینین در کاردیومیوسیت های تمایز یافته به روش western-blot و حضور کاردیومیوسیت های تمایز یافته بوسیله رنگ آمیزی ایمنوهیستوشیمی با آنتی بادی اولیه ضد دسمین بررسی شد. نتایج: پس از طی مراحل تمایزی، از اطراف اجسام جنینی پلیت شده سلول های تمایز یافته دوکی شکل ضربان دار در گروه های تجربی در مقایسه با گروه کنترل به وضوح قابل مشاهده بود. با توجه به مقایسه کمی باندهای حاصله از pcr rt- اجسام جنینی پلیت شده در محیط های با فاکتورهای مختلف مشاهده گردید که فاکتور tgf-β2 از فاکتور bmp-2 و هر دو فاکتور به صورت همزمان از هر یک به تنهایی، اثر افزایشی بیشتری بر تمایز کاردیومیوسیتها از سلول های بنیادی جنینی دارد. این امر با اندازه گیری کمی باندهایrt-pcr حاصله از بیان ژن های تخصصی قلبی در سلول های کاردیومیوسیت های تمایز یافته نشان داده شد. همچنین در اجسام جنینی پلیت شده در محیط با هر دو فاکتور پس از تمایز، بیان دو پروتئین دسمین و آلفا اکتینین توسط western-blot و نیز حضور سلول های کاردیومیوسیت توسط نشانگذاری پروتئین دسمین با روش ایمنوهیستوشیمی تأیید شد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که تأثیر همزمان دو فاکتور bmp-2, tgfb2 همراه با کاهش سرم در طی زمان کشت و جسم جنینی، هدایت سلول های بیماری جنینی را در جهت تمایز به کاردیوسیتها افزایش می دهد.
منابع مشابه
مطالعه تاثیر فاکتورهای رشد عصاره شش موش بالغ بر تمایز سلول های بنیادی بند ناف جنین به سلول های خونی در شرایط in vitro
سابقه و هدف: سلول های بنیادی بند ناف به علت دارا بودن توان تمایز به سلول های مختلف، دسترسی آسان و عدم خطر برای فرد دهنده، کاربرد درمانی فراوانی دارند. در این مطالعه، از بند ناف به عنوان منبع اصلی تولید سلول های بنیادی استفاده شد و عصاره شش موش که حاوی فاکتورهای رشد محرک خونسازی تجویز شد تا تمایز به سلول های خونی تحریک شود.روش بررسی: در این پژوهش بنیادی، کاربردی و عملی، ابتدا سلول های بنیادی از ...
متن کاملتأثیر DMSO در القای تمایز کاردیومیوسیت ها از سلول های کارسینومای جنینی P19در شرایط آزمایشگاهی
مقدمه: در مطالعه حاضر توانایی تمایز سلول های کارسینومای جنینی P19در غلظت های مختلف DMSO به کاردیومیوسیت ها مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش ها: جهت تمایز سلول های P19، اجسام شبه جنینی(Embryoid Bodies,EBs) به روش قطرات آویزان طی 2 روز تشکیل شدند. سپسEBs به مدت 18 روز تحت القائات غلظت های مختلف DMSO 1/0 درصد، 5/0 درصد، 1 درصد، 5/1 درصد، 2 درصد قرار گرفتند. طی تمایز تعداد ضربان در دقیقه هر سه ر...
متن کاملتمایز سلولهای بنیادی جنینی موش به رده لنفوئیدی با فاکتورهای رشد مشخص
Background and Aim: Embryonic stem cells are identified with two unique characteristics. First, they can be maintained and expanded as pure populations of undifferentiated cells, a characteristic which is known as self renewal aspect of embryonic stem cells. Second, these cells can give rise to all body cell types. In the current study, we used a feeder-free condition to differentiate mouse emb...
متن کاملتاثیر ژل رویال بر تمایز سلول های بنیادی به سلول های شبه عصبی در شرایط آزمایشگاهی
سابقه و هدف: سلولهای بنیادی کارسینومایی 19P توانایی تمایز به سلولهای سه لایه جنینی را دارند. از آنجائیکه سلولهای تمایز یافته می توانند باعث کاهش عوارض ناشی از بیماریهای تحلیل برنده سیستم عصبی شوند. لذا این تحقیق با هدف بررسی تمایز سلولهای بنیادی P19 به سلولهای عصبی تحت تاثیر ژل رویال صورت گرفت. مواد و روشها: در این مطالعه بنیادی-کاربردی اجسام شبه جنینی حاصل از کشت معلق سلولهای P19 به ظرفهای ژ...
متن کاملتاثیر همزمان -Azacytidin5 و DMSO در القای تمایز کاردیومیوسیت ها از سلول های کارسینومای جنینی P19 در شرایط آزمایشگاهی
متن کامل
بررسی تأثیر عصارۀ کبدی جنینی بر سلول های بنیادی مزانشیمی بند ناف به سلول های کبد
سلول های بنیادی سلول هایی با پتانسیل تمایزی گسترده شمال، دانشکده علوم زیستی، گروه زیست شناسی، در مراحل مختلف تکوینی هستند که میتوانند در ترمیم و بازسازی یک بافت صدمه دیده ایفای نقش کنند. این سلول ها دارای ویژگی خود نوزایی بوده و قادرند برای مدت طولانی سلولهای مشابه خود را تولید کنند، این خصوصیات سلول های بنیادی را کاندید مناسبی در درمان بیماری هایی نظیر بیماری های مزمن کبدی، پارکینسون، آلزا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
journal of reproduction and infertilityجلد ۷، شماره ۴، صفحات ۳۳۸-۳۴۹
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023